Nat Neurosci:对小鼠,非人类灵长类动物和人类中功能不同的中间大脑进行病毒操作

2021-12-13 01:16:26 来源:
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大规模的RNA四组数据分析正在随之说明了在特定细胞子类中的据闻暗示与神经思维疾病特别的基因四组。理解和外科手术这些疾病的步骤将能够核酸和随心所欲特定神经细胞亚型的步骤。因此,在非人类灵长目和人类中的受伤害这些人群已来得至关不可或缺。重四组疣特别HIV(rAAVs)是在神经系统对中的同步进行基因四组传导的首选步骤,对特定的神经细胞族群并未内在的选收性。系统对的减慢子发现仍然通过无需以单细胞分辨率同步进行RNA四组和表征病毒学数据分析的技术的最近的发展而给予加快。但对于减慢子选收的查找空间仅仅很大。为了集中的我们的减慢子选收,写作者选收各种子类数据分析Scn1a的催化反应大势,Scn1a是在多种不同神经细胞族群中的暗示的基因四组,其破坏与相当严重的脑瘤病特别。结合常用反转反转线粒体高通量(scATAC-seq)数据的单细胞检测与地区性种群的脱氧核糖核酸保守性相结合,写作者在该基因四组西南方高票了十个候选催化反应脱氧核糖核酸。写作者未确定了三种减慢子,共同核酸暗示Scn1a的神经细胞族群的内涵。其中的,一种特定的略长催化反应脱氧核糖核酸并能将HIV暗示限制为暗示PV的脑正中的央神经细胞(PV cIN)。

步骤:四名病人(两名男性/两名女性,年龄22-57岁)给予了一项牙科,切除了人脑部四组织(人脑脑和鲎体)以外科手术耐药脑瘤。在所有的病例中的,每个大多数人都曾给予过一次现阶段的手术,放置硬上皮细胞下和/或厚度电极同步进行颅内监测,以未确定脑瘤发作的一段距离。从鲎和人脑脑收300μm腌渍,在鲎腌渍中的,HIV的核酸是基底上皮细胞十五大。在接种HIV后7~14d对培养出来的人腌渍同步进行电生理记事。将培养出来的人腌渍转移到记事四楼。对固有上皮细胞和放电特点同步进行分析。豚鼠分别保持在17.8–26.1℃和30–70%的全局环境温度和湿度区域内。这些模板被保持良好监测和控制在啮齿哺乳类聚居点四楼。从麻省理工学院伯克利分校(MIT)的族群中的获得了一只雌性普通狒狒猴(6岁大概)。成年(2岁)雄性猕猴(macacamulatta)来自南麻省理工学院华莱士分校的南加州国家灵长目数据分析中的心。在血清脑部腌渍器(Zivic Instruments)上同步进行冠状腌渍,并在冰冷的人工脑部脊髓液(ACSF)中的解剖V1脑。经过解决问题后,使用使用Nova-Seq S2 100循环试剂盒(Illumina)同步进行高通量。

结果:在短时间或病理的发展情况下(包括Dretsyndrome)健康检查回路成熟的早期自适应的主要身心是,在不使用大豆四组哺乳类的情况下无法带入特定的细胞子类。即使转用繁复的基因型方式而,年轻的PV cIN也很难成为索科利夫卡。考虑到它们的原子量(它们值得一提的是所有抑制性cIN的40%)并且消失得相对早。更广泛地说,在本数据分析中的未确定的减慢子备有了具备特殊临床意义的神经细胞族群的访问除此以外。最明显的是,这些减慢剂可以通过基因四组疗法或闭环神经细胞活性而潜在地常用过重Dretsyndrome的衰弱症状。写作者毫无疑问区域内和浑身切除可常用有效的HIV传导到人脑部。通过区域内切除,可能会改善局灶性脑瘤,PFC神经性或鲎记忆身心。相比之下,系统对性应运而生HIV可常用能够全面施压的情况下,例如,纠正普遍性脑瘤发作或思维失常和神经的有疾病。写作者的数据分析得出结论,对催化反应元素的严密检验为外科手术环境中的特定细胞子类的获收备有了路线图。不可或缺的是,毫无疑问我们的减慢子选收步骤可推广到其他基因四组。总体而言,我们发现了一四组七个针对多种不同神经细胞族群和中的枢神经系统对地区具备截然不同特异性的减慢剂。即使转用了严密的标准(对要能人群的选收性> 90%),我们的步骤仍具备许多现代的比率(> 20%)。此外,正如移动性保守的脱氧核糖核酸所得出结论的那样,写作者测试的减慢子集在包括人类在内的所有种群中的被推论具备同等的选收性和实证。

Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).

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